科研产出
西花蓟马FKBP6蛋白多克隆抗体制备、真核表达及亚细胞定位
《农业生物技术学报 》 2024 北大核心 CSCD
摘要：西花蓟马(Frankliniella occidentalis)是为害全球农业生产的入侵害虫，通过探寻西花蓟马亲免素蛋白FK506-binding protein 6 (FKBP6)的生物功能，为防控西花蓟马挖掘新的靶标。本研究运用生物信息学分析西花蓟马FKBP6蛋白(GenBank No. XP＿026292958.1)，克隆FKBP6基因(GenBank No. XM＿026437173.1)，原核诱导表达FKBP6蛋白并制备其多克隆抗体，利用Bac-to-Bac杆状病毒系统表达FKBP6蛋白，借助荧光免疫(immunofluorescence, IF)标记和Western blot检测多克隆抗体及亚细胞定位。结果显示，氨基酸多序列比对与系统进化发育树分析发现，20种昆虫的FKBP6蛋白之间存在保守的区域，但只在种间亲缘性较高。利用杆状病毒系统在Sf9细胞内表达FKBP6蛋白，使用多克隆抗体经IF和Western blot检测显示，该抗体能与FKBP6蛋白发生特异性结合；亚细胞定位发现，FKBP6被定位到细胞质。本研究为FKBP6蛋白的生物功能研究提供分子条件。
关键词： 西花蓟马 FKBP6蛋白 抗体制备 Bac-to-Bac杆状病毒表达系统
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大理烟区西花蓟马种群动态变化及蓝板诱集效率分析
《湖南农业科学 》 2023
摘要：西化蓟马是烟草番茄斑萎病毒传播的主要媒介,研究采用分子生物学的检测方法于 2022 年 5-6 月从烤烟不同生育时期西花蓟马种群数量、健康烟株与感病烟株西花蓟马数量的差异以及蓝板悬挂高度对西花蓟马的诱集效果3 个方面分析了大理烟区西花蓟马的种群数量动态变化.结果表明:在 2022 年 5-6 月采集的 10 批次蓝板上均检测到了西花蓟马的存在,且西花蓟马种群数量呈先增加后下降的趋势,5月诱集到西花蓟马检出率较高(16.75%),表明西花蓟马在5月的危害较严重,可在 5 月上旬加强对其成虫的防治;健康烟株蓝板上的西花蓟马检测率极显著低于感病烟株,由此推测西花蓟马的数量与番茄斑萎病的发生流行可能存在一定的相关性,因此认为防控西花蓟马种群数量是减轻烟田病毒病发生的一种有效举措;在烟株生长过程中,应该根据烟草的生长状况适时调节蓝板的悬挂高度,在生长发育前期可以采取与烟株顶端齐平的悬挂高度,5月下旬以后可以采取 85 cm的悬挂高度,以达到更好的诱集效果.
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利用酵母双杂交技术筛选鉴定与番茄环纹斑点病毒NSs蛋白互作的西花蓟马蛋白
《昆虫学报 》 2020 北大核心 CSCD
摘要：[目的]筛选鉴定西花蓟马Franiklinella ocicdentalis体内与番茄环纹斑点病毒(tomato zonate spot virus, TZSV)NSs蛋白互作的介体因子.[方法]利用酵母双杂交技术筛选与TZSV NSs互作的西花蓟马蛋白;进行序列分析鉴定后,将捕获的蛋白与NSs基因回转到酵母细胞,利用营养缺陷型培养基鉴定蛋白互作情况.再利用GST Pull-down技术验证TZSV NSs与鉴定出的西花蓟马蛋白的体外互作关系.[结果]构建了TZSV NSs的酵母双杂交诱饵质粒pGBKT7-NSs,确定了诱饵质粒对酵母AH109细胞无毒性,并且无自激活活性.序列分析发现与TZSV NSs互作的西花蓟马蛋白为类电压依赖性阴离子通道(voltage-dependent anion-selective channel-like, VDAC).酵母回转实验显示TZSV NSs与西花蓟马VDAC在酵母细胞内存在特异性互作.GST Pull-down结果表明TZSV NSs与西花蓟马VDAC在体外存在相互作用.[结论]通过酵母双杂交和GST Pull-down技术,分别在酵母细胞内和体外证实了TZSV NSs和西花蓟马VDAC存在特异性互作.这些结果有助于揭示西花蓟马VDAC蛋白调控西花蓟马持久传毒的机制,为虫传病毒病的防治提供理论基础.
关键词： 西花蓟马 酵母双杂交 番茄环纹斑点病毒 NSs蛋白 VDAC
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不同辣椒品种抗(耐)西花蓟马的初步筛选及苗期防御酶的变化
《生物安全学报 》 2013
摘要：【背景】西花蓟马自2003年传入我国以来,呈扩张趋势。辣椒上西花蓟马以化学防治为主,国内尚无抗性资源保护、抗(耐)虫性资源筛选等相关研究。【方法】以20个辣椒品种和西花蓟马为材料,采用幼苗接虫法,根据危害症状分级,计算为害指数并作为抗(耐)评价指标,然后测定不同抗(耐)材料苗期受西花蓟马危害后防御酶活性的变化,探讨其与抗性的关系。【结果】在20个供试辣椒品种中,湘研13号和博辣4号对西花蓟马的抗性较强,其他品种抗性较差,兴蔬绿剑抗性最差;不同辣椒品种抗(耐)虫性与过氧化物酶变化呈正相关,但与过氧化氢酶相关性不显著。【结论与意义】本研究建立了辣椒抗(耐)西花蓟马的筛选评价体系,为挖掘抗西花蓟马的种质资源和西花蓟马的有效防控提供了依据。
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室内药剂交替使用对西花蓟马抗药性发展的影响
《植物保护 》 2012 北大核心 CSCD
摘要：分别单独使用毒死蜱、多杀菌素和两种农药交替使用连续处理西花蓟马(Frankliniella occidentalis)18代,采用浸渍法从第6至第18代每隔2世代测定3个汰选种群对毒死蜱和多杀菌素的敏感性。结果表明,毒死蜱和多杀菌素交替汰选种群比单一药剂连续汰选种群抗性上升趋势缓慢,F18代时交替使用汰选种群对毒死蜱和多杀菌素的抗性倍数分别为10.89倍和17.19倍,而毒死蜱单一汰选种群对毒死蜱的抗性倍数达到24.19倍,多杀菌素单一汰选种群对多杀菌素的抗性倍数达到20.78倍。因此,交替或轮换使用药剂可以延缓西花蓟马抗药性的发展。
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