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西花蓟马FKBP6蛋白多克隆抗体制备、真核表达及亚细胞定位

文献类型: 中文期刊

作者: 王鑫 1 ; 郑立敏 1 ; 赵星月 1 ; 苗淑月 1 ; 叶倩 1 ; 张宇 1 ; 史晓斌 1 ; 张德咏 1 ; 陈建斌 1 ;

作者机构: 1.湖南大学生物学院隆平分院;湖南省农业科学院植物保护研究所;内蒙古农业大学园艺与植物保护学院;河南省农业科学院烟草研究所

关键词: 西花蓟马;FKBP6蛋白;抗体制备;Bac-to-Bac杆状病毒表达系统

期刊名称: 农业生物技术学报

ISSN: 1674-7968

年卷期: 2024 年 32 卷 07 期

页码: 1606-1613

收录情况: 北大核心 ; CSCD

摘要: 西花蓟马(Frankliniella occidentalis)是为害全球农业生产的入侵害虫,通过探寻西花蓟马亲免素蛋白FK506-binding protein 6 (FKBP6)的生物功能,为防控西花蓟马挖掘新的靶标。本研究运用生物信息学分析西花蓟马FKBP6蛋白(GenBank No. XP_026292958.1),克隆FKBP6基因(GenBank No. XM_026437173.1),原核诱导表达FKBP6蛋白并制备其多克隆抗体,利用Bac-to-Bac杆状病毒系统表达FKBP6蛋白,借助荧光免疫(immunofluorescence, IF)标记和Western blot检测多克隆抗体及亚细胞定位。结果显示,氨基酸多序列比对与系统进化发育树分析发现,20种昆虫的FKBP6蛋白之间存在保守的区域,但只在种间亲缘性较高。利用杆状病毒系统在Sf9细胞内表达FKBP6蛋白,使用多克隆抗体经IF和Western blot检测显示,该抗体能与FKBP6蛋白发生特异性结合;亚细胞定位发现,FKBP6被定位到细胞质。本研究为FKBP6蛋白的生物功能研究提供分子条件。

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