科研产出
三种野生稻候选抗病基因的克隆与分析
《分子植物育种 》 2007 CSCD
摘要：候选抗性基因克隆策略是克隆植物新抗性基因的重要途径。根据已知NBS-LRR类抗病基因结构中的氨基酸保守区域,设计兼并引物,通过RT-PCR扩增、克隆和测序,从茶陵野生稻,东乡野生稻和小粒野生稻中共获得了11条NBS-LRR类抗病基因同源序列。通过聚类分析可将同源序列分为3类,其中茶陵野生稻中得到1类,东乡野生稻中得到2类,而小粒野生稻中得到3类。但是小粒野生稻包含有其他两种野生稻的序列。三类序列都与水稻抗病基因RPR1具有较高的同源性,有一类氨基酸序列同源性甚至高达88%,可能为其家族成员。利用电子定位将三类序列定位在水稻基因组11号染色体上RPR1附近。根据序列比对分析结果认为其中可能有1～2个新抗病基因。
全文链接
请求原文
辣椒青枯病菌的分离及其PCR检测
《湖南农业科学 》 2007 CSCD
摘要：从辣椒上分离的青枯病菌用TTC、523平板划线培养可得到典型的单菌落(中央粉红色或红色,具流动性),共分离到20个纯培养物。实验不需要提取青枯病菌的DNA,可直接利用细菌粗悬液进行PCR扩增反应,并克隆到281 bp的分子片段。实验结果为鉴定辣椒青枯病菌株提供了一种快速特异的检测手段。
全文链接
请求原文
甘蓝型油菜pep基因片段的克隆和种子特异性反义表达载体的构建
《湖南农业大学学报(自然科学版) 》 2005 北大核心 CSCD
摘要：丙酮酸羧化酶(PEP)是控制油菜蛋白质/油脂含量比例的一个关键酶,抑制种子中pepc基因的表达,使其底物(丙酮酸)更多地朝生成油脂的方向流动,对提高种子的含油量,增加油菜的经济价值具有重要的意义.利用PCR技术从甘蓝型油菜湘油15号基因组中扩增了PEP基因片段,并将其克隆到pGEM-TEasy载体上进行测序.测序结果表明:扩增片段长576bp,与Yannai报道的PEP基因相应区域的同源性为95%.用扩增引物上设计的BamHI和SacI两位点酶将PEP基因片段切下,反向插入到pBI121.N质粒的Napin启动子之后,构建了种子特异性反义PEP表达载体,并通过农杆菌介导法将反义PEP基因转化到湘油15号中.
关键词： 甘蓝型油菜 PCR 反义PEP 种子特异性表达载体
全文链接
请求原文
