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甘蓝型油菜pep基因片段的克隆和种子特异性反义表达载体的构建

文献类型： 中文期刊

作者： 白德朗 1 ; 陈烈臣 2 ; 熊兴华 3 ; 李栒 3 ; 官春云 3 ;

作者机构： 1.国家杂交水稻工程技术研究中心

2.湖南农业大学期刊社

3.作物基因工程湖南省重点实验室

关键词： 甘蓝型油菜;PCR;反义PEP;种子特异性表达载体

期刊名称： 湖南农业大学学报(自然科学版)

ISSN： 1007-1032

年卷期： 2005 年 31 卷 03 期

页码： 249-252

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 丙酮酸羧化酶(PEP)是控制油菜蛋白质/油脂含量比例的一个关键酶,抑制种子中pepc基因的表达,使其底物(丙酮酸)更多地朝生成油脂的方向流动,对提高种子的含油量,增加油菜的经济价值具有重要的意义.利用PCR技术从甘蓝型油菜湘油15号基因组中扩增了PEP基因片段,并将其克隆到pGEM-TEasy载体上进行测序.测序结果表明:扩增片段长576bp,与Yannai报道的PEP基因相应区域的同源性为95%.用扩增引物上设计的BamHI和SacI两位点酶将PEP基因片段切下,反向插入到pBI121.N质粒的Napin启动子之后,构建了种子特异性反义PEP表达载体,并通过农杆菌介导法将反义PEP基因转化到湘油15号中.

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