科研产出
华南生态型黄瓜'CU2'遗传转化体系的优化
《辣椒杂志 》 2024
摘要：黄瓜是一种具有重要经济和生物价值的蔬菜作物.基因组编辑技术的广泛应用推动了黄瓜育种改良和基因组功能表征研究的快速发展.目前华南生态型黄瓜品种仍缺乏具有普遍适用性农杆菌介导的遗传转化体系,这限制了基因组编辑技术的高效应用.本研究以华南生态型黄瓜品种'CU2'为材料,CsMATL基因编辑转基因株创制为例,进行遗传转化体系各种因素的优化,实现了该黄瓜品种外植体再分化芽的最高遗传转化率.研究结果表明选用SGM培养基,添加2 mg/L 6-BA、1 mg/L ABA后进行播种,在200 μmol/L AS浓度下侵染外植体,共培养后采用摇床以及两次200 mg/L TMT溶液和三次无菌水清洗脱菌,之后在含有100 mg/L Kan、2 mg/L 6-BA、1 mg/L ABA的分化培养基中进行分化培养,利用上述优化方案可将'CU2'的遗传转化率提高至 3.19%.该研究为华南生态型黄瓜遗传转化体系的优化和功能基因操作奠定了理论基础.
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茶树SRAP反应体系优化及引物筛选
《茶叶通讯 》 2012
摘要：以茶树叶片DNA为模板,采用正交试验设计,以Mg2+、引物、dNTP、TaqDNA聚合酶、模板DNA 5种因素5个水平,对茶树SRAP反应体系进行了研究,建立了茶树SRAP最佳反应体系。结果表明,茶树SRAP最佳反应体系为:Mg+22.0mmol/L、引物各0.5μmol/L、dNTP 0.1mmol/L、TaqDNA聚合酶0.5U/μL、模板DNA 4ng/μL,总体积为10μL。运用该体系,从128个SRAP引物组合中筛选出扩增条带清晰、多态性丰富的56个引物组合。这一体系的建立及引物组合的筛选为今后利用SRAP标记技术进行茶树分子遗传学研究提供了理论依据。
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