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辣椒CaBRI1基因克隆与功能分析

分子植物育种 2023 北大核心 CSCD

摘要:为了解辣椒CaBRI1基因结构特征及功能,本研究以辣椒自交系6421为实验材料,克隆CaBRI1基因,对其进行生物信息学分析、亚细胞定位、表达模式分析,并采用病毒沉默(VIGS)初步验证该基因在辣椒中的功能。结果表明,CaBRI1编码区序列长3 642 bp,编码1 213个氨基酸;CaBRI1蛋白包含6个亮氨酸重复与1个磷酸激酶结构域,具有2个跨膜区域,N端跨膜螺旋可能为信号肽。洋葱表皮细胞GFP瞬时表达结果显示CaBRI1定位于细胞膜。RT-qPCR分析表明,6421同一发育时期不同组织中CaBRI1表达量存在显著差异,且都为茎尖中表达量最高。VIGS沉默6421中CaBRI1后,沉默植株发育迟缓、株高变矮,CaBRI1表达量显著下降。本研究结果可为进一步阐明CaBRI1在辣椒中的生物学功能提供参考。

关键词: 辣椒 CaBRI1 克隆 功能分析

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黄芩黄酮对小鼠生长性能和抗氧化能力及盲肠微生物的影响

湖南农业大学学报(自然科学版) 2023 北大核心 CSCD

摘要:选取3周龄昆明小鼠40只,随机分成4组,分别为对照组(CON)及黄芩黄酮低剂量组(HQHTL)、中剂量组(HQHTM)、高剂量组(HQHTH),对照组每天用0.9%氯化钠溶液灌胃,黄芩黄酮组每天分别用25、50、100 mg/kg的黄芩黄酮溶液灌胃,灌胃28 d后测定小鼠的生长性能、抗氧化能力和盲肠的微生物多样性及群落组成。结果表明:与CON相比,用黄芩黄酮灌胃显著(P<0.05)提高了小鼠的平均日增质量;小鼠的血清总超氧化物歧化酶活性显著(P<0.05)或极显著(P<0.01)升高,丙二醛水平显著(P<0.05)或极显著(P<0.01)降低;HQHTM和HQHTH小鼠的盲肠微生物Sobs和Bootstrap指数显著(P<0.05)下降,Chao和Ace指数极显著(P<0.01)下降;HQHTM和HQHTH小鼠的盲肠放线菌门(Actinobacteriota)相对丰度显著(P<0.05)上升,疣微菌门(Verrucomicrobiota)相对丰度极显著(P<0.01)上升,HQHTH小鼠的盲肠脱铁杆菌门(Deferribacterota)相对丰度极显著(P<0.01)下降,HQHTL、HQHTM小鼠的盲肠脱铁杆菌门相对丰度显著(P<0.05)下降;用黄芩黄酮灌胃的小鼠盲肠的Norankf<sub>Ruminococcaceae和普雷沃菌属(Prevotella)相对丰度均显著(P<0.05)下降,HQHTL、HQHTM小鼠的盲肠厌氧球菌属(Anaerotruncus)显著(P<0.05)下降,而HQHTM、HQHTH小鼠的盲肠艾克曼菌属(Akkermansia)相对丰度极显著(P<0.01)上升。可见,用黄芩黄酮灌胃可提高小鼠的生长性能,改善小鼠的抗氧化机能,调控盲肠的微生物菌群,其中50mg/kg黄芩黄酮促小鼠生长的效果最好。

关键词: 小鼠 黄芩黄酮 生长性能 抗氧化能力 盲肠 微生物多样性 细菌群落组成

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纳米材料层状双氢氧化物(LDH)对茄二十八星瓢虫dsECR致死效应的影响

环境昆虫学报 2023 北大核心 CSCD

摘要:纳米材料被视为重要的RNA干扰增效物质。层状双氢氧化物(LDH)是具有生物相容性的可降解纳米材料,可以显著提高dsRNA防控黄瓜花叶病毒的效果。为明确LDH能否提高昆虫RNA干扰的效果,以期促进RNA生物农药在农业害虫防治中的应用和推广,本研究选择茄二十八星瓢虫Henosepilachna vigintioctopunctata的EcR基因进行RNA干扰介导的致死效应研究。将LDH与dsEcR组装形成复合物LDH-dsEcR,利用琼脂糖凝胶电泳确定LDH-dsEcR的最佳装载比例。通过静置法检测LDH-dsEcR的稳定性,借助透射电子显微镜验证其组装状态。采用浸叶法测定LDH-dsEcR的增效性,使用体视镜观察其对试虫形态的影响。结果表明:LDH与dsEcR可形成稳定的复合物,其最佳装载比为16∶1。LDH对茄二十八星瓢虫无毒性,但经LDH与dsEcR处理,部分试虫虫体呈黑褐色,或无法蜕皮化蛹,或维持在预蛹状态。遗憾的是LDH-dsEcR复合物的增效作用不明显,推测昆虫肠道的酸碱度可能是影响LDH-dsRNA增效的因素之一。本研究首次为利用LDH研究昆虫RNA生物农药提供了可观的理论基础。

关键词: 纳米材料 层状双氢氧化物 LDH 茄二十八星瓢虫 RNA干扰

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植物生长调节剂在果蔬中的应用与安全性分析研究进展

食品工业科技 2023 北大核心 CSCD

摘要:植物生长调节剂可有效提高果蔬产量、品质,其在果蔬生产中的应用越来越多;对植物生长调节剂残留危害风险的评估也成为了研究热点。本文综述了植物生长调节剂的主要类别、作用和在果蔬中的应用现状;并归纳分析了果蔬中多效唑、氯吡脲、赤霉酸、乙烯利、2,4-二氯苯氧乙酸(2,4-D)等几种主要生长调节剂的危害和残留现状;发现果蔬中乙烯利的平均残留量最高,葡萄、豆芽、草莓等果蔬中植物生长调节剂残留情况最为严重,其潜在的安全隐患应引起重视;而国家现行植物生长调节剂标准中并未覆盖一些果蔬,亟需完善植物生长调节剂残留相关标准及风险评估。

关键词: 植物生长调节剂 果蔬 残留 限量标准 风险评估

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强配合力抗稻瘟病两系恢复系P143的选育与应用

杂交水稻 2023 北大核心 CSCD

摘要:P143是以扬稻6号为母本与从国际水稻研究所引进的IR69713-127-2-1-3-2R杂交选育而成的两系恢复系。该恢复系株叶形态好,花粉量大,千粒重大,配合力强,生育期适中,含Pi9和Pita 2个抗稻瘟病基因,穗期耐高温能力强。已配组Y两优143等5个杂交组合通过品种审定,并在南方稻区有较大推广面积。

关键词: 两系杂交水稻 恢复系 P143 抗稻瘟病 选育

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杂交稻和常规稻对复合污染稻田土壤砷镉提取效果差异研究

环境科学研究 2023 北大核心 CSCD

摘要:为实现对稻田土壤砷(As)、镉(Cd)污染的同步移除,利用根箱试验,选取代表性杂交稻(HR)和常规稻(CR)品种作为修复材料进行提取.为了评估种植HR和CR对土壤As、Cd的提取效果,以未种植水稻土壤作为对照(CK),利用孔隙水采集器在其全生育期内采集并监测土壤水溶态As、Cd浓度的变化;分别在水稻分蘖期、成熟期采用梯度扩散薄膜技术(diffusive gradients in thin-films,DGT)原位实时测定根际土壤剖面有效态As、Cd浓度;收获时利用分级提取法分析土壤As、Cd赋存形态及总量变化,并分析植株各部位的As、Cd累积量.结果表明:水稻生长能够有效消耗土壤中生物有效态As、Cd,且HR较CR表现出更高效的As、Cd同步富集能力.水稻成熟期,种植HR的土壤中DGT-As(扩散梯度薄膜提取态As)浓度较种植CR和CK处理分别下降69%和71%,DGT-Cd(扩散梯度薄膜提取态Cd)浓度分别降低35%和58%;HR和CR收获后土壤总As含量分别减少8%和1%,总Cd含量分别减少31%和14%;HR对土壤As、Cd的单株去除量分别为CR的1.2和4.5倍;每年种植两季HR对土壤As、Cd的移除率分别为CR的1.2和4.3倍.研究显示,种植HR对As、Cd具有更高效的提取能力,可优先作为修复材料对稻田土壤生物有效态As、Cd进行专性提取减量,为As、Cd复合污染稻田土壤清洁提供了一条有益路径;但还需结合水分优化管理、施加促溶剂等方式形成修复链,进一步提高修复效率,缩短修复年限.

关键词: 杂交稻(HR) 常规稻(CR) 提取 砷(As) 镉(Cd) 水稻土

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QuEChERS前处理-高效液相色谱法测定MS培养基中6-苄氨基嘌呤、萘乙酸与吲哚丁酸的含量

理化检验(化学分册) 2023 北大核心 CSCD

摘要:将MS培养基样品捣碎、混匀,分取10 g,加入乙腈10 mL,振荡20 min。加入氯化钠1.14 g、无水硫酸钠2.24 g,振荡20 min,离心5 min。上清液过0.22μm滤膜,滤液进入高效液相色谱仪,在InertSustain C18色谱柱(150 mm×4.6 mm, 5μm)上以不同体积比的乙腈和磷酸盐缓冲溶液(pH 3.5)的混合液进行梯度洗脱分离,并在二极管阵列检测器中以272,221,223 nm检测波长检测6-苄氨基嘌呤(6-BA)、萘乙酸(NAA)、吲哚丁酸(IBA)。结果显示:3种植物生长调节剂的质量浓度在0.05~28.00 mg·L-1内与其对应的峰面积呈线性关系,检出限(3S/N)为0.044 5~0.085 5 mg·kg-1。按标准加入法进行回收试验,回收率为97.3%~103%,测定值的相对标准偏差(n=5)为0.42%~2.2%。采用121℃蒸汽对MS培养基灭菌20 min后,6-BA、NAA的检出量较灭菌前的没有明显变化,IBA的检出量明显下降,且灭菌后检出量减少量和灭菌前的检出量呈线性正相关。

关键词: QuEChERS 高效液相色谱法 植物生长调节剂 MS培养基

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水稻白叶枯病广谱抗性基因Xa7共显性功能标记的开发与应用

福建农业学报 2023 CSCD

摘要:【目的】对水稻白叶枯病广谱抗性基因Xa7进行精准检测和世代跟踪,通过分子标记检测Xa7基因材料的纯合或杂合型。【方法】根据Xa7、xa7和无等位基因型序列的差异,通过Premier 5软件设计了含4条引物Xa7-F、Xa7-R、Xa7null-F、Xa7null-R的功能标记Xa7fun,且采用PCR方法分别对不同遗传资源材料进行分子标记特异性检测和验证,自然高温下于孕穗期对含Xa7基因的3份杂交改良系及亲本采用剪叶接种法接种7个白叶枯病菌菌株进行抗性鉴定,并于成熟期考察记录其农艺性状。【结果】分子标记特异性检测结果表明,Xa7基因纯合型材料R084可扩增出大小为91 bp的条带,无等位基因型材料Nip可扩增出大小为153 bp的条带,杂合体Nip/R084可扩增出大小为91 bp、153 bp的条带,共显性标记Xa7fun得到的电泳条带与引物设计时预测的目标片段完全吻合;18份不同类型的种质资源均未扩增出91 bp大小的功能条带,说明这些材料均不含Xa7基因;杂交改良系Ry-1、Ry-2、Ry-3均仅含有91 bp大小的功能条带,表明Xa7基因纯合;在高温下,华占对7个菌株表现为高感、中感或感病,R084除对菌株PX099感病外,对其余6菌株均为高抗、中抗或抗病,Ry-1对GDA2、 HNA1-4、 FuJ、 GD1358、YN24等5个菌株为高抗或中抗,Ry-2对GDA2、GD1358、HNA1-4、PXO86、YN24等5个菌株为高抗或抗病,Ry-3对HNA1-4、FuJ、GDA2、GD1358、PXO86、YN24等6个菌株均为高抗或中抗。因此,Xa7基因的渗入对华占改良系Ry-1、Ry-2、Ry-3的白叶枯病抗性有大幅度的提高;通过对3个改良系和亲本等农艺性状分析表明,3个改良系的生育期、株高、穗长、单株总粒数、结实率、千粒重介于R084和华占之间,Ry-1和Ry-3单株有效穗数显著高于华占和R084,Ry-2与华占、R084差异不显著,单株产量与华占或R084相比差异不显著。【结论】本研究开发的功能标记Xa7fun能够准确、高效地识别水稻Xa7基因纯合型、杂合型等,而且Xa7基因的渗入不会造成杂交改良系重要农艺性状变差,可在水稻白叶枯病抗性分子育种中推广应用。

关键词: 水稻 白叶枯病 Xa7基因 分子标记 抗性

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基于SNP芯片的油菜核心种质遗传多样性分析

分子植物育种 2023 北大核心 CSCD

摘要:为揭示湖南省油菜种质资源库中核心种质的遗传多样性,本研究利用油菜组60K基因芯片对266份甘蓝型油菜品系及其10份近缘种品系10份进行全基因组SNP位点分析,原始数据通过Visual Basic软件筛选,利用Powermarker软件计算SNP位点PIC值和供试材料的遗传距离、聚类分析。结果表明:根据SNP标记缺失率和染色体分布均匀度共筛选到24 593个SNP位点,平均每条染色体分布1 294个多态性位点,位点的Nei’s基因多样性指数(H)、主要等位基因频率(MAF)和多态性信息含量(PIC)平均值分别为0.401、0.688 3、0.316;276份供试材料间遗传距离在0.000 1~0.477之间,平均为0.329 6,Kinship值为0的占71.49%;供试材料可分成5个大类,其中最大类(含有250份种质)又可分为9个亚类,供试材料的类群分布与种质类型、地理来源一致。研究结果表明供试育种亲本种质遗传多样性丰富,可更客观反映供试材料的亲缘关系,为种质资源的育种利用提供理论依据。

关键词: 油菜 近缘种品系 单核苷酸多态性(SNP) 遗传多样性 聚类分析

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转Cry1Ab基因水稻恢复系KR1128的鉴定及组合评价

杂交水稻 2023 北大核心 CSCD

摘要:螟虫是危害水稻生产的重要虫害,长江中下游稻区尤以二化螟发病较多,对水稻稳产、增产造成较大影响。研究以转Cry1Ab基因抗虫恢复系mfb-MH86为供体,强优恢复系HR1128为受体,通过田间回交转育,结合分子标记检测、农艺性状筛选得到抗虫恢复系新材料KR1128-1、KR1128-2和KR1128-3。产量性状分析结果表明,改良恢复系与非转基因对照HR1128相比,株高显著降低,但单株有效穗数有所改善,均显著高于HR1128;改良恢复系的结实率均略高于亲本HR1128,以KR1128-3的结实率最高(82.0%)。在稻米品质上,改良新株系与HR1128多数指标无显著差异,少数性状稍有改善,如KR1128-3在整精米率、垩白面积和垩白度上均显著优于HR1128。酶联免疫吸附试验显示,改良恢复系均能够稳定表达Bt蛋白,以茎秆中抗虫蛋白含量最高、穗部籽粒中最少;室内螟虫抗性鉴定结果证明,所有改良系的抗虫性均大幅提升,达到高抗水平。测配结果表明,两系杂交稻抗虫组合整体表现好于三系杂交稻组合,其中恢复系KR1128-3与Y58S、丰源A和炳1A所配组合的产量均高于其他转基因组合和HR1128与各不育系所配组合,丰产性较好。研究为选育适应长江中下游稻区的高产抗虫转基因水稻新组合储备了种质资源。

关键词: 水稻 恢复系 杂交组合 螟虫 转基因 Cry1Ab 抗虫蛋白

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