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褐飞虱SRAP-PCR体系的优化与确立

文献类型: 中文期刊

作者: 荆胜利 1 ; 何光存 1 ; 江磊 2 ; 李刚 2 ; 刘虹 2 ; 覃瑞 2 ;

作者机构: 1.武汉大学生命科学学院杂交水稻国家重点实验室

2.中南民族大学南方少数民族地区生物资源保护及综合利用工程中心

关键词: 褐飞虱;SRAP-PCR;正交试验;反应体系优化

期刊名称: 植物保护

ISSN: 0529-1542

年卷期: 2014 年 40 卷 02 期

页码: 103-108

收录情况: 北大核心 ; CSCD

摘要: 采用L16(45)正交试验设计,对褐飞虱SRAP-PCR反应体系中的Mg2+、dNTPs、TaqDNA聚合酶、引物浓度和DNA模板浓度5个因素进行优化,确立了褐飞虱SRAP-PCR最佳的反应体系。结果表明:褐飞虱SRAP-PCR最佳反应体系为:总体积10μL,Mg2+浓度3mmol/L、dNTPs为150μmol/L、TaqDNA聚合酶2U、正反向引物各0.3μmol/L、DNA用量25ng以及1×PCR Buffer。使用生物型1雌虫与生物型2雄虫单对杂交F2群体对优化后的褐飞虱SRAP-PCR反应体系进行验证,获得了条带清晰、多态性丰富的图谱,并发现共显性条带,表明确定的反应体系稳定可靠。

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