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茶树ISSR-PCR反应体系的正交优化

文献类型: 中文期刊

作者: 黄建安 1 ; 李娟 1 ; 钟兴刚 2 ; 朱旗 3 ;

作者机构: 1.茶学教育部重点实验室

2.湖南省茶叶研究所

3.湖南农业大学

关键词: 茶树;ISSR-PCR;反应体系;正交设计

期刊名称: 湖南农业大学学报(自然科学版)

ISSN: 1007-1032

年卷期: 2010 年 36 卷 04 期

页码: 414-417

收录情况: 北大核心 ; CSCD

摘要: 对茶树ISSR-PCR反应体系中的5因素(Taq酶浓度(U/(20μL))、Mg2+浓度(mmol/L)、模板DNA质量浓度(ng/(20μL))、dNTP浓度(mmol/L)、引物浓度(μmol/L))在4水平上进行正交优化试验,筛选出各因素的最佳水平,建立茶树最佳ISSR-PCR反应体系,即20μL反应体系中,TaqDNA聚合酶为1.0U/(20μL),Mg2+为2.0mmol/L,模板为40ng/(20μL),dNTP为0.20mmol/L,引物为0.25μmol/L.对茶树ISSR-PCR最佳反应体系进行梯度退火试验,确定引物ISSR1、UBC881的最适退火温度分别为52.4、59.0℃.

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