文献类型: 中文期刊
作者: 黄旭 1 ; 田苗苗 1 ; 肖妃垚 1 ; 刘娟 1 ; 王振 1 ; 单杨 1 ;
作者机构: 1.湖南大学隆平分院
关键词: 柑橘;黄烷酮-3-羟化酶;生成途径;特征分析;原核表达
期刊名称: 食品科学技术学报
ISSN: 1671-1513
年卷期: 2021 年 002 期
页码: 65-72
摘要: 香橙素是柑橘类黄酮的重要组成,黄烷酮-3-羟化酶是香橙素生成途径中的关键作用酶。对黄烷酮-3-羟化酶的特点进行总结与分析并在大肠杆菌中进行表达。首先从NCBI数据库筛选了来自柑橘、陆地棉、玉米、水母雪莲和欧芹的5种f3h,对其进行理化性质、蛋白质二三级结构、序列比对等生物信息学分析并以大肠杆菌为宿主进行表达。发现5种来源的f3h,其基因开放阅读框为1 032~1 119 bp,编码343~372个氨基酸,蛋白分子质量为38.89~41.45 kDa,理论等电点在5.43~5.96,且不同物种F3H的理化性质、结构域和蛋白质结构也有一定的相似性。通过构建大肠杆菌表达体系发现:黄烷酮-3-羟化酶均能进行原核表达,除去来源于水母雪莲的F3H未检测到香橙素的生成,其余4种F3H均能将柚皮素转化为香橙素且产物生成量不同,其中ZmF3H生成量最高达20.12mg/L。
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