利用qPCR法检测OsPIMT1转基因水稻中的外源片段拷贝数

罗曦; 吴方喜; 林悦龙; 何炜; 连玲; 谢华安; 张建福; 《福建稻麦科技 》 2017

摘要：水稻转化过程中,多个拷贝数整合到基因组中影响遗传稳定性和基因表达。传统的Southern杂交检测法鉴定费时费力,不适合目前高通量和自动化的检测要求。因此研究通过比较定量除草剂草铵膦抗性基因(bar)和甘油醛-3-磷酸脱氢酶GAPDH2,建立了基于实时荧光定量PCR的拷贝数检测法。利用此体系对9个独立的异天冬氨酸甲基转移酶OsPIMT1转基因T0代植株进行了荧光定量分析,其中6个为单拷贝,3个为双拷贝,经过Southern杂交和分离比分析验证,表明该方法能够快速,准确的鉴定水稻含有草铵膦抗性基因的水稻转基因植株。

关键词： 水稻 转基因 草铵膦抗性基因(bar) 甘油醛-3-磷酸脱氢酶GAPDH2 实时定量PCR 拷贝数