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利用qPCR法检测OsPIMT1转基因水稻中的外源片段拷贝数

文献类型： 中文期刊

作者： 罗曦 1 ; 吴方喜 1 ; 林悦龙 1 ; 何炜 1 ; 连玲 1 ; 谢华安 1 ; 张建福 2 ;

作者机构： 1.;福建省农业科学院水稻研究所;农业部华南杂交水稻种质创新与分子育种重点实验室/福州(国家)水稻改良分中心/福建省作物种质创新与分子育种省部共建国家重点实验室培育基地/杂交水稻国家重点实验室华南研究基地/福建省作物分子育种工程实验室/福建省水稻分子育种重点实验室

2.;福建省农业科学院水稻研究所;农业部华南杂交水稻种质创新与分子育种重点实验室/福州(国家)水稻改良分中心/福建省作物种质创新与分子育种省部共建国家重点实验室培育基地/杂交水稻国家重点实验室华南研究基地/福建省作物分子育种工程实验室/福建省水稻分子育种重点实验室;

关键词： 水稻;转基因;草铵膦抗性基因(bar);甘油醛-3-磷酸脱氢酶GAPDH2;实时定量PCR;拷贝数

期刊名称： 福建稻麦科技

ISSN： 1008-9799

年卷期： 2017 年 04 期

页码： 39-42

摘要： 水稻转化过程中,多个拷贝数整合到基因组中影响遗传稳定性和基因表达。传统的Southern杂交检测法鉴定费时费力,不适合目前高通量和自动化的检测要求。因此研究通过比较定量除草剂草铵膦抗性基因(bar)和甘油醛-3-磷酸脱氢酶GAPDH2,建立了基于实时荧光定量PCR的拷贝数检测法。利用此体系对9个独立的异天冬氨酸甲基转移酶OsPIMT1转基因T0代植株进行了荧光定量分析,其中6个为单拷贝,3个为双拷贝,经过Southern杂交和分离比分析验证,表明该方法能够快速,准确的鉴定水稻含有草铵膦抗性基因的水稻转基因植株。

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