褐飞虱SRAP-PCR体系的优化与确立

荆胜利; 何光存; 江磊; 李刚; 刘虹; 覃瑞; 《植物保护 》 2014 北大核心 CSCD

摘要：采用L16(45)正交试验设计,对褐飞虱SRAP-PCR反应体系中的Mg2+、dNTPs、TaqDNA聚合酶、引物浓度和DNA模板浓度5个因素进行优化,确立了褐飞虱SRAP-PCR最佳的反应体系。结果表明:褐飞虱SRAP-PCR最佳反应体系为:总体积10μL,Mg2+浓度3mmol/L、dNTPs为150μmol/L、TaqDNA聚合酶2U、正反向引物各0.3μmol/L、DNA用量25ng以及1×PCR Buffer。使用生物型1雌虫与生物型2雄虫单对杂交F2群体对优化后的褐飞虱SRAP-PCR反应体系进行验证,获得了条带清晰、多态性丰富的图谱,并发现共显性条带,表明确定的反应体系稳定可靠。

关键词： 褐飞虱 SRAP-PCR 正交试验 反应体系优化