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资源类型: 中文期刊
关键词:代谢工程(模糊匹配)
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代谢工程改造酿酒酵母从D-木糖合成柚皮苷

2025

摘要:目的探索柑橘活性成分柚皮苷的生物合成方法。方法通过酶筛选、多拷贝整合以及前体供给策略构建合成柚皮素的酿酒酵母工程菌株。在此基础上通过引入柚皮苷合成途径、优化UDP-葡萄糖供应并最终实现从D-木糖合成柚皮苷。结果通过筛选柚皮素途径关键酶确认最优黄酮合成酶为PhCHS。进一步将柚皮素合成途径整合至多拷贝位点,构建的菌株Z39M2能够合成36.53 mg/L柚皮素;过表达CAT2、xPK-PTA途径和ACC1m优化丙二酰辅酶A供应构建菌株Z44,其柚皮素产量提高至72.96 mg/L;通过引入柚皮苷合成途径成功合成了35.60 mg/L柚皮苷,进一步过表达PGM1和UGP1将柚皮苷产量提升至76.67 mg/L。结论通过代谢工程策略构建了一株能够从D-木糖合成柚皮苷的酿酒酵母工程菌株。

关键词: D-木糖 柚皮苷 柚皮素 酿酒酵母 代谢工程

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利用代谢工程改造谷氨酸棒杆菌产丙酮酸研究

《食品科学技术学报 》 2023 EI 北大核心 CSCD

摘要:丙酮酸是一种重要的有机酸,可以作为前体物质,参与合成多种有机化合物,在生物体的能量代谢中发挥着重要作用。为提高丙酮酸产量,选择利用代谢工程改造谷氨酸棒杆菌(Corynebacterium glutamicum)生产丙酮酸。利用同源重组的方法,依次敲除谷氨酸棒杆菌中与丙酮酸代谢支流相关的5个关键基因(丙酮酸醌氧化还原酶基因pqo、丙酮酸羧化酶基因pyc、转氨酶基因alaT、缬氨酸-丙酮酸氨基转移酶基因avtA、丙酮酸脱氢酶基因aceE),摇瓶发酵72 h后丙酮酸的产量达到14.64 g/L。通过过表达编码转酮醇酶基因tkt、转醛酶基因tal、磷酸烯醇丙酮酸羧激酶基因pck,增加合成丙酮酸前体物质的供应。最终,复合培养基摇瓶发酵72 h后,发酵液中丙酮酸的产量达到15.39 g/L,与野生型菌株相比提高了28倍。研究旨在为利用微生物发酵生产丙酮酸提供一定的理论参考。

关键词: 谷氨酸棒杆菌 丙酮酸 代谢工程 同源重组 过表达

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