文献类型： 中文期刊

作者： 方哲 ¹ ; 操文军 ¹ ; 刘娟 ¹ ; 张思琪 ¹ ; 肖志强 ¹ ; 单杨 ¹ ;

作者机构： 1.湖南大学生物学院隆平分院;湖南省农业科学院农产品加工研究所/果蔬贮藏加工与质量安全湖南省重点实验室/湖南省果蔬加工与质量安全国际科技创新合作基地

关键词： 谷氨酸棒杆菌;丙酮酸;代谢工程;同源重组;过表达

期刊名称： 食品科学技术学报

ISSN： 2095-6002

年卷期： 2023 年 03 期

页码： 139-147

收录情况： EI ; 北大核心 ; CSCD

摘要： 丙酮酸是一种重要的有机酸，可以作为前体物质，参与合成多种有机化合物，在生物体的能量代谢中发挥着重要作用。为提高丙酮酸产量，选择利用代谢工程改造谷氨酸棒杆菌(Corynebacterium glutamicum)生产丙酮酸。利用同源重组的方法，依次敲除谷氨酸棒杆菌中与丙酮酸代谢支流相关的5个关键基因(丙酮酸醌氧化还原酶基因pqo、丙酮酸羧化酶基因pyc、转氨酶基因alaT、缬氨酸-丙酮酸氨基转移酶基因avtA、丙酮酸脱氢酶基因aceE),摇瓶发酵72 h后丙酮酸的产量达到14.64 g/L。通过过表达编码转酮醇酶基因tkt、转醛酶基因tal、磷酸烯醇丙酮酸羧激酶基因pck,增加合成丙酮酸前体物质的供应。最终，复合培养基摇瓶发酵72 h后，发酵液中丙酮酸的产量达到15.39 g/L,与野生型菌株相比提高了28倍。研究旨在为利用微生物发酵生产丙酮酸提供一定的理论参考。