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一种黏性末端接头应用于侧翼序列分离的方法

专利类型: 中国发明申请

专利权人: 湖南杂交水稻研究中心

发明人: 袁定阳;段美娟;余东;谭炎宁;孙志忠;袁光杰;袁贵龙;孙学武;刘瑞芬;赵炳然;袁隆平

专利号: CN201210097394.8

摘要: 一种黏性末端接头应用于侧翼序列分离的方法,包括以下步骤:1)提取待测基因组DNA;2)选择同尾酶;设计并合成对应的连接接头;3)用同尾酶酶切基因组,形成具有相同的黏性末端的DNA片段;4)电泳检测酶切质量,并定量DNA片段浓度;将所述接头与基因组酶切产物连接,形成“接头-酶切片段-接头”的DNA片段;5)纯化“接头-酶切片段-接头”的DNA片段,PCR扩增;6)回收步骤3)获得的片段并测序;7)分析测序结果,获得已知序列的未知侧翼序列;8)未知侧翼序列的验证。本发明之侧翼序列分离的方法,连接效率高,通用性高,成本低。

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