文献类型： 中文期刊
作者： 羊健 1 ; 张松柏 2 ; 张恒木 1 ; 刘勇 3 ; 陈剑平 3 ;
作者机构： 1.浙江省农业科学院病毒学与生物技术研究所
2.湖南省农业科学院植物保护研究所
3.湖南农业大学植物保护学院
关键词： CSN5B基因;原核表达;抗血清制备
期刊名称： 生物技术通讯
ISSN： 1009-0002
年卷期： 2016 年 27 卷 04 期
页码： 525-528
摘要： 目的:克隆水稻COP9信号复合物5B亚基(CSN5B)的基因,原核表达CSN5B蛋白并制备多克隆抗体。方法:用RT-PCR技术从日本晴水稻中扩增得到CSN5B蛋白基因Os CSN5B并将其连接至p EASYTM-T5 Zero克隆载体,然后将其亚克隆至原核表达载体p ET-32a+,并导入大肠杆菌BL21plys S宿主菌中诱导表达;重组的CSN5B融合蛋白经Ni-NTA His.Bind Resin纯化后免疫兔子制备多克隆抗体,并经Western印迹分析。结果与结论:获得了CSN5B蛋白的特异性抗体,Western印迹显示CSN5B蛋白在水稻植株中呈高水平表达,为进一步探讨该基因的功能奠定了基础。
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