水稻叶绿体转化载体pBS的构建及融合基因功能的初步鉴定

李丁; 左佳; 贺荣华; 韩小霞; 邢俊杰; 李祺; 曹孟良; 《生命科学研究 》 2012 CSCD

摘要：利用PCR方法分别从载体pchN-CAT-Bar和Psk51中分离得到编码膦丝菌素乙酰转移酶基因bar和绿色荧光蛋白基因sgfp,并在bar基因前段连接T7 leader sequence/5′-UTR和T7 10 N-terminus的8个氨基酸序列.运用融合PCR技术,得到bar和sgfp的融合基因片段BS.以水稻叶绿体基因组中的trnI和trnA为同源重组片段,来自烟草叶绿体16S rRNA的Prrn为启动子,psbA基因的TpsbA为终止子,融合片段作为双效筛选标记,构建水稻叶绿体转化载体pBS.大肠杆菌原核表达检测到明显荧光,基因枪轰击TP309愈伤,筛选抗性愈伤.

关键词： 水稻 叶绿体转化 bar基因 绿色荧光蛋白(sGFP) 融合PCR