文献类型： 中文期刊
作者： 李丁 1 ; 左佳 1 ; 贺荣华 1 ; 韩小霞 1 ; 邢俊杰 1 ; 李祺 1 ; 曹孟良 1 ;
作者机构： 1.中南大学
关键词： 水稻;叶绿体转化;bar基因;绿色荧光蛋白(sGFP);融合PCR
期刊名称： 生命科学研究
ISSN： 1007-7847
年卷期： 2012 年 16 卷 05 期
页码： 389-394
收录情况： CSCD
摘要： 利用PCR方法分别从载体pchN-CAT-Bar和Psk51中分离得到编码膦丝菌素乙酰转移酶基因bar和绿色荧光蛋白基因sgfp,并在bar基因前段连接T7 leader sequence/5′-UTR和T7 10 N-terminus的8个氨基酸序列.运用融合PCR技术,得到bar和sgfp的融合基因片段BS.以水稻叶绿体基因组中的trnI和trnA为同源重组片段,来自烟草叶绿体16S rRNA的Prrn为启动子,psbA基因的TpsbA为终止子,融合片段作为双效筛选标记,构建水稻叶绿体转化载体pBS.大肠杆菌原核表达检测到明显荧光,基因枪轰击TP309愈伤,筛选抗性愈伤.
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