科研产出
水稻锌指蛋白基因O_sBBX22响应热胁迫的功能分析
《基因组学与应用生物学 》 2018 北大核心 CSCD
摘要：利用RNA干涉技术研究水稻锌指蛋白基因O_sBBX22的生物学功能,为探讨O_sBBX22响应热胁迫的机制、培育抗逆水稻、减轻高温对水稻的损害奠定基础。通过观察转基因突变体植株和野生型植株在热胁迫下的表型差异,分析O_sBBX22生物学功能;采用半定量PCR和荧光定量PCR检测O_sBBX22以及相关的热激转录因子(HSF)、热激蛋白(HSP)基因在转基因突变体株系中的表达水平;通过原位组织化学检测过氧化氢在野生型、转基因突变体株系叶片中的定位和积累情况。结果表明,在0~5 h热胁迫条件下,与野生型株系相比,O_sBBX22的表达在转基因突变体植株中明显下调;而野生型O_sBBX22受热信号诱导,随着热激时间的增加,O_sBBX22的表达量呈先上升后下降的趋势,且在热激1 h时表达量最高。相关的HSF和HSP也受热信号诱导,野生型株系中的HSFA2a、HSFA7、HSP16.9和HSP100表达量均比转基因突变体株系高,且在热激1 h时,HSFA2a、HSP16.9和HSP100表达量最高,而HSFA7在热激3 h时表达最高。热胁迫3 h,经DAB染色,转基因突变体株系叶片上出现的红褐色斑点主要集中于叶脉和受损伤部位,且明显多于野生型。锌指蛋白基因O_sBBX22在水稻苗期热胁迫应答中具有重要的作用,野生型株系抗热能力明显高于O_sBBX22抑制表达转基因株系;HSFA2a、HSFA7、HSP16.9和HSP100可能参与了O_sBBX22介导的水稻耐热调控。
关键词： 水稻锌指蛋白 热胁迫 RNAi干涉 热激转录因子 热激蛋白
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水稻铜/锌超氧化物歧化酶铜伴侣基因克隆与表达分析
《基因组学与应用生物学 》 2017 北大核心 CSCD
摘要：本研究对水稻铜/锌超氧化物歧化酶铜伴侣(OsCCS)的基本特征、分布情况及功能做了初步探究。通过同源蛋白序列比对,发现OsCCS在多个物种中保守存在。通过芯片分析,结果表明OsCCS热胁迫后表达上调,且OsCCS在各组织中表达有差异,其中在叶中的表达量高,在茎、穗中表达量低。通过实时定量PCR对芯片结果进行验证,发现与芯片结果一致。构建了pCAMBIA2300-OsCCS-GFP载体,通过转化烟草瞬时表达,发现OsCCS蛋白定位于细胞核。上述研究为深入了解OsCCS在水稻中的生物学功能提供了基础。
关键词： 铜锌超氧化物歧化酶铜伴侣 瞬时表达 热胁迫 实时定量PCR
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水稻锌指蛋白基因OsBBX24响应热胁迫的研究
《分子植物育种 》 2017 北大核心 CSCD
摘要：环境因子光和温度对植物生长发育起重要调控作用,OsBBX24基因属于光温信号途径重要的调控元件B-box(BBX)家族基因成员。OsBBX24基因启动子序列分析发现其含有HSE热胁迫相关元件,水稻基因芯片数据分析发现其表达受热诱导,实时定量PCR分析进一步证明OsBBX24基因受热胁迫表达上调。热胁迫处理发现OsBBX24-RNAi转基因水稻材料株系苗期的耐热性比野生型Kitaake要弱,且超氧化物歧化酶、过氧化物酶活性比野生型低,脯氨酸含量也低于野生型,丙二醛含量比野生型高;热激转录因子HsfA2a及热激蛋白Hsp16.9、Hsp60热胁迫处理后野生型中的表达水平比OsBBX24-RNAi株系高。由此证实,OsBBX24基因在水稻响应热胁迫表现为正调控,为深入研究其响应热胁迫分子机理及作用机制奠定基础。
关键词： 热胁迫 锌指蛋白 过氧化物酶 热激蛋白 热激转录因子 荧光定量PCR
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