菰均一化全长cDNA文库的构建

颜育民; 张志刚; 邹世湘; 彭琼; 《湖南农业科学 》 2017

摘要：为了获得国家二级保护植物品种菰的功能基因信息,并克隆功能基因片段,研究以SMART(switching mechanism at 5 end of RNA transcript)方式合成菰全长cDNA,结合DSN(duplex-specific nuclease)均一化技术,构建菰叶片组织的均一化全长cDNA文库。该cDNA文库库容量大,达到了3.6×10~6 PFU/m L,插入片段平均长度为1 000 bp,重组率为97.9%。均一化全长cDNA文库能有效富集低丰度表达基因,降低冗余率,适用于目的基因的筛选,以及后续的基因、蛋白互作分析。

关键词： 菰 均一化 cDNA文库 功能基因