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菰均一化全长cDNA文库的构建

文献类型: 中文期刊

作者: 颜育民 1 ; 张志刚 1 ; 邹世湘 2 ; 彭琼 3 ;

作者机构: 1.湖南杂交水稻研究中心

2.湖南旺湘隆农业有限公司

3.湖南省农业生物技术研究中心

关键词: 菰;均一化;cDNA文库;功能基因

期刊名称: 湖南农业科学

ISSN: 1006-060X

年卷期: 2017 年 04 期

页码: 11-13+18

摘要: 为了获得国家二级保护植物品种菰的功能基因信息,并克隆功能基因片段,研究以SMART(switching mechanism at 5 end of RNA transcript)方式合成菰全长cDNA,结合DSN(duplex-specific nuclease)均一化技术,构建菰叶片组织的均一化全长cDNA文库。该cDNA文库库容量大,达到了3.6×10~6 PFU/m L,插入片段平均长度为1 000 bp,重组率为97.9%。均一化全长cDNA文库能有效富集低丰度表达基因,降低冗余率,适用于目的基因的筛选,以及后续的基因、蛋白互作分析。

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