单宁酸诱导猪肾细胞氧化损伤和凋亡

王吉; 张琳玉; 刘翔燕; 肖海思; 李鑫; 严思思; 袁志航; 梁曾恩妮; 文利新; 邬静; 《动物营养学报 》 2020 北大核心 CSCD

摘要：本试验对单宁酸(TA)介导的动物肾细胞毒性的分子机制展开研究,旨在为消减和利用饲料中的抗营养因子提供试验依据.采用猪肾细胞系PK?15细胞,以不同浓度[0(空白对照)、10、20、30μmol/L]TA处理PK?15细胞24 h后,测定细胞活性、乳酸脱氢酶(LDH)活性、氧化损伤指标、线粒体膜电位(MMP)、凋亡相关蛋白表达量、细胞周期.结果 显示:TA剂量依赖性地降低PK?15细胞的活力.与空白对照相比,30μmol/L TA极显著增加了培养基中LDH的活性(P<0.01);极显著升高了PK?15细胞中丙二醛(MDA)含量(P<0.01),显著或极显著降低了谷胱甘肽(GSH)含量(P<0.01)以及谷胱甘肽过氧化物酶(GSH?Px)(P<0.01)、超氧化物歧化酶(SOD)(P<0.01)和过氧化氢酶(CAT)(P<0.05)活性,极显著增加了活性氧(ROS)含量(P<0.01);极显著降低了MMP(P<0.01).与空白对照相比,30μmol/L TA可使Bcl?2相关的X蛋白(Bax)/B细胞淋巴瘤-2(Bcl?2)(P<0.01)、剪切体-半胱天冬酶-3(cleaved?Caspase?3)/前体-半胱天冬酶-3(pro?Caspase?3)(P<0.01)和剪切体-半胱天冬酶-9(cleaved?Caspase?3)/前体-半胱天冬酶-9(pro?Caspase?9)(P<0.05)显著或极显著增加;此外,30μmol/L TA还可诱导PK?15细胞在S期积累,发生S期阻滞.由此得出,高浓度的TA诱导PK?15细胞的氧化损伤和细胞内ROS介导的线粒体途径凋亡,并导致了细胞的S期阻滞.

关键词： 单宁酸 PK?15细胞 氧化损伤 细胞凋亡 抗营养因子