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利用RT-PCR扩增和分析柑桔裂皮病类病毒

文献类型： 中文期刊

作者： 林木兰 1 ; 张春立 1 ; 吴德喜 2 ; 陈捷 3 ;

作者机构： 1.中国科学院武汉病毒研究所

2.湖南省园艺研究所

3.武汉同济医科大学协和医院血液研究所

关键词： 柑桔裂皮病类病毒;反转录PCR;DIG标记cDNA探针

期刊名称： Acta Botanica Sinica

ISSN： 0577-7496

年卷期： 1997 年 07 期

页码： 613-617

收录情况： SCI ; 北大核心 ; CSCD

摘要： 参考国外CEVd-A株中央保守区段(C区)和左端区段(T区),设计并合成引物Cl(-)、C2(+)、C3(+)、T1(-)、T2(+)。对感染 CEVd中国分离物的柑桔(Citrus L.)和香橼(Citrus medica L.)总核酸进行了cDNA第一链合成和PCR扩增,其中C1/C3、C1/C2分别能从感病香橼和柑桔总核酸中扩增出210bp和370bp左右的特异DNA,分别相当于CEVd的左半部和全长片段,T1/T2未能扩增出产物;健康香橼和柑桔总核酸中均未能扩增出产物。扩增结果用DIG标记的CEVd-cDNA探针进行了确证。扩增结果说明:CEVd中国分离物在左端T区与CEVd-A株存在差异。PAGE-银染法分析扩增产物表明:建立的RT-PCR方法可从约0.1ng柑桔总核酸中扩增出全长CEVd-cDNA。

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