文献类型： 中文期刊
作者： 肖姬玲 1 ; 张屹 1 ; 阮万辉 1 ; 魏林 1 ; 梁志怀 2 ;
作者机构： 1.;中南大学研究生院隆平分院;湖南省西瓜甜瓜研究所;湖南省植物保护研究所
2.;中南大学研究生院隆平分院;湖南省西瓜甜瓜研究所;湖南省植物保护研究所;
关键词： 实时荧光定量PCR;土壤病原真菌;尖孢镰刀菌;检测下限
期刊名称： 植物保护
ISSN： 0529-1542
年卷期： 2017 年 04 期
页码： 129-133+144
收录情况： 北大核心 ; CSCD
摘要： 为实现荧光定量PCR对土壤病原真菌数量更为高效、灵敏的检测,本研究将液体培养的孢子悬浮液和长年耕作的水稻土制作成孢子浓度为4×10~1~4×10~6 spore/g的带菌土,采用MoBio PowerSoil@DNA Isolation Kit提取模拟带菌土壤总DNA,引入常规PCR预扩增包含qPCR目标序列的1 446bp片段,以预PCR产物为模板进行qPCR,构建荧光定量PCR标准曲线。研究结果表明:以试剂盒提取的带菌土壤总DNA为模板绘制的qPCR标准曲线相关系数r为0.985,检测下限为4×10~3 spore/g土;引入预PCR后,qPCR标准曲线相关系数r为0.974,检测下限为4×10~2 spore/g土,较未引入时提高了10倍,结合不同土壤病原真菌的特异性引物,该检测方法可为土壤病原真菌的有效定量检测提供技术支撑。
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