文献类型: 中文期刊
作者: 臧晓南 1 ; 张学成 1 ; 袁定阳 2 ; 赵炳然 2 ; 唐俐 2 ;
作者机构: 1.中国海洋大学海洋生命学院
2.国家杂交水稻工程技术研究中心
关键词: 节旋藻;藻蓝蛋白α亚基基因;裂合酶基因;重组;大肠杆菌
期刊名称: 中国海洋大学学报(自然科学版)
ISSN: 1672-5174
年卷期: 2011 年 41 卷 05 期
页码: 63-66+74
收录情况: 北大核心 ; CSCD
摘要: 为探索节旋藻藻蓝蛋白的生物合成机理,以钝顶节旋藻(Arthrospira platensisFACHB314)基因组DNA为模板克隆了藻蓝蛋白α亚基基因cpcA、催化脱辅基蛋白与色基结合的裂合酶基因cpcE和cpcF,以及催化色基合成的铁氧蛋白氧化还原酶基因pcyA;以Synechocystissp.PCC6803基因组DNA为模板克隆了亚铁血红素氧化酶基因hox1。然后分别将cpcA、cpcE和cpcF基因构建到质粒pACYCDuet-1中,将hox1和pcyA基因构建到质粒pET-24a(+)中,用电击法将二者共同转化E.coliBL21(DE3),经诱导表达得到具有荧光活性的节旋藻藻蓝蛋白α亚基。在590 nm激发波长下,荧光发射峰为637.8 nm,证实了节旋藻自身的裂合酶CpcE和CpcF能够催化色基PCB与藻蓝蛋白脱辅基结合产生有荧光活性的藻蓝蛋白α亚基,为表达有荧光活性的藻蓝蛋白提供理论和实验基础。
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