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优化菌落原位杂交体系筛选野生稻基因组文库

文献类型: 中文期刊

作者: 李磊 1 ; 李强 1 ; 韩小霞 1 ; 邢俊杰 1 ; 崔玲玲 1 ; 李玲珑 1 ; 张朝良 1 ; 张秋平 1 ; 曹孟良 1 ;

作者机构: 1.湖南长沙西城杂交水稻基因工程研究中心

关键词: 菌落原位杂交;基因组文库;溶菌酶;阳性克隆

期刊名称: 生命科学研究

ISSN: 1007-7847

年卷期: 2008 年 12 卷 04 期

页码: 50-54

收录情况: CSCD

摘要: 菌落原位杂交仍是当今筛选基因组文库的重要方法之一,但难以保持背景清晰和阳性杂交点明显的稳定的杂交体系.通过对杂交膜不同处理方法的对比,表明利用溶菌酶处理杂交体系进行菌落原位杂交筛选,其杂交结果背景较干净,且能根据杂交信号的强弱很清晰地显色阳性黑点.采用该法筛选野生稻基因组文库,已筛选出22个阳性克隆,并测序分析均为阳性克隆.

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[1]RecA蛋白介导的小粒野生稻STK类抗性基因富集文库的构建. 崔玲玲,唐丽,陶小平,邢俊杰,李丁,谢灵灵,贺荣华,左佳,曹孟良. 2010

[2]小粒野生稻可转化人工染色体文库初步构建及筛选. 曹筑荣,曹孟良. 2008

[3]东乡野生稻NBS-LRR类抗性基因同源序列的分离与鉴定. 杲修杰,曹孟良. 2008

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