文献类型： 中文期刊
作者： 杨科 1 ; 肖姬玲 2 ; 张屹 2 ; 魏林 3 ; 梁志怀 1 ;
作者机构： 1.湖南大学研究生院隆平分院
2.湖南省农业生物技术研究所
3.湖南省植物保护研究所
关键词： 西瓜;尖孢镰刀菌西瓜专化型(FON);环介导等温技术(LAMP);DNA简提法
期刊名称： 农业生物技术学报
ISSN： 1674-7968
年卷期： 2021 年 29 卷 009 期
页码： 1836-1844
收录情况： 北大核心 ; CSCD
摘要： 由尖孢镰刀菌西瓜专化型(Fusarium oxysporum f.sp.niveum,FON)引起的西瓜枯萎病(Fusarium wilt of watermelon)是西瓜(Citrullus lanatus)上的主要病害,在我国西瓜种植区均有发生,建立西瓜枯萎病菌的快速检测方法对该病的诊断和防控十分重要.FON是造成西瓜枯萎病的主要病原真菌.本研究以FON的特异DNA片段为靶标,设计了一套灵敏、特异的快速环介导等温技术(loop-mediated isothermal amplification,LAMP)引物,并结合DNA快速提取方法,建立了西瓜枯萎病菌的LAMP检测体系.引物特异性实验结果显示,唯有FON-0、FON-1、FON-2的LAMP检测结果呈现黄绿色,且LAMP产物琼脂糖凝胶电泳结果呈现梯形条带,说明引物具有较高特异性.灵敏度检测结果表明,此LAMP体系对FON-1基因组DNA的检测下限为10 pg/μL,对植物带菌量的检测下限为5×102孢子/g.盆栽实验结果表明,以根部组织为样品,此体系能对西瓜幼苗是否被FON侵染作出正确判断.该体系从DNA提取到获得检测结果仅需90 min左右,且病原菌菌丝和植物组织均可作为检测材料.反应结果肉眼可辨,具有操作简单、特异性强、灵敏度高、稳定性强、应用性广的特点.本检测体系可为田间西瓜枯萎病菌的快速诊断提供技术支撑.
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