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低温诱导东乡野生稻幼苗期叶片cDNA文库的构建和鉴定

文献类型: 中文期刊

作者: 邢俊杰 1 ; 崔玲玲 1 ; 韩小霞 1 ; 阳志刚 1 ; 李丁 1 ; 谢灵灵 1 ; 曹孟良 1 ;

作者机构: 1.中南大学

关键词: 东乡野生稻;低温诱导;cDNA文库构建;SMART技术

期刊名称: 杂交水稻

ISSN: 1005-3956

年卷期: 2010 年 25 卷 02 期

页码: 59-62+77

收录情况: 北大核心 ; CSCD

摘要: 从8℃低温诱导的东乡野生稻幼叶中提取总RNA,以总RNA为模板,利用SMART技术合成第1链,再经LD-PCR扩增合成第2链后,将获得的双链cDNA与双元表达载体YPL3连接,重组质粒电转入大肠杆菌,成功构建了东乡野生稻cDNA文库。经测定,原始文库滴度平均为4.4×107cfu/mL,平均插入片段约1kb,重组率为100%,符合cDNA文库构建要求,为后续利用酵母功能互补技术筛选东乡野生稻有利基因奠定了基础。

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