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Taq DNA聚合酶的制备和纯化

文献类型： 中文期刊

作者： 詹祎捷 1 ; 刘之熙 2 ; 朱克永 2 ;

作者机构： 1.北京联合大学应用文理学院

2.湖南省水稻研究所

关键词： Taq DNA聚合酶;Bio-Rex70柱层析;聚丙烯酰胺凝胶电泳;PCR

期刊名称： 湖南农业科学

ISSN： 1006-060X

年卷期： 2013 年 13 期

页码： 10-11，15

摘要： Taq DNA聚合酶是分子生物学研究中最常用的热稳定DNA聚合酶之一。试验利用含Taq DNA聚合酶基因的pTaq表达质粒转化大肠杆菌E.coli菌株,用异丙基硫代-β-D-乳糖苷(IPTG)诱导表达耐热Taq DNA聚合酶;采用热变性沉淀杂蛋白,SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)检测纯度,Bio-Rex 70柱层析纯化蛋白,PCR反应检测Taq DNA聚合酶的浓度和活性。结果表明:分离纯化制备的Taq DNA聚合酶,其纯度、酶活性和酶特异性均达到市售的Taq DNA聚合酶水平。

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