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土壤原核微生物RNA加Poly(A)尾的方法研究

文献类型: 中文期刊

作者: 黄艳岚 1 ; 秦红灵 2 ;

作者机构: 1.湖南省作物研究所

2.中国科学院研究生院

关键词: 土壤;微生物;RNA;加Poly(A)尾;逆转录

期刊名称: 湖南农业科学

ISSN: 1006-060X

年卷期: 2016 年 02 期

页码: 1-4+8

摘要: 采取共提取法提取土壤微生物总RNA后,经过去DNA、过柱纯化等手段,利用Poly(A)聚合酶在纯化RNA末端添加Poly(A)尾,将产物逆转录成c DNA第一链,用细菌16S r DNA引物和nos Z(氧化亚氮还原酶基因)引物扩增目的片段。结果表明:利用此方法能够获得带有Poly(A)尾的土壤原核微生物核糖体RNA和m RNA,产物经过一次转录后,可用于扩增土壤微生物目的基因。此方法相对于利用目的基因特异下游引物来作为逆转录引物获得c DNA更加方便,用于研究土壤原核微生物多个基因的表达特征时,此方法十分实用。

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