科研产出
一种优化的辣椒尖孢炭疽菌遗传转化体系
《植物病理学报 》 2023 北大核心 CSCD
摘要：由辣椒尖孢炭疽菌（Colletotrichum acutatum）侵染引起的炭疽病是辣椒生产中最具有破坏性的真菌病害，严重影响辣椒的品质和产量。本研究以辣椒尖孢炭疽病菌HHDL02为对象，采用1 mol·L-1 NH4Cl 2%的酶裂解液裂解分生孢子萌发2 h的芽管，裂解2～3 h可以高效制备原生质体，结合PEG介导转化法成功将GFP基因导入，其转化菌株菌落形态、菌丝生长速率、分生孢子形态、孢子萌发、附着胞形成、产孢量和致病性与野生型菌株无明显差异，且后代荧光信号遗传稳定。PEG介导的原生质体转化适合辣椒尖孢炭疽菌遗传操作，有助于其致病机理的研究。
关键词： 辣椒尖孢炭疽菌 PEG介导转化 绿色荧光蛋白 芽管
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哈茨木霉T2-16的GFP标记及其生防特性
《中国生物防治学报 》 2019 北大核心 CSCD
摘要：优化高效拮抗生防菌哈茨木霉T2-16的转化条件,筛选出与野生型菌株具有相似生防特性的阳性转化子,为生防木霉菌T2-16的定殖动态、分布规律等研究打下基础。通过PCR和分子克隆技术构建具有G418抗性基因的绿色荧光(GFP)表达载体pKN-sGFP,利用PEG-CaCl_2介导的原生质体转化法,获得强荧光表达的哈茨木霉T2-16转化子,并将其与野生型菌株的生物特性进行比较,筛选出与野生型菌株具有相似生防特性的阳性转化子。试验结果显示,哈茨木霉T2-16在20℃培养条件下对1000μg/mL G418敏感,在上述优化条件下,转化获得稳定遗传的阳性转化子TG2-10;进一步比较其与野生型菌株的生物特性发现,两者之间无明显差异,可用于下一步哈茨木霉T2-16生防机理的研究。
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利用绿色荧光蛋白GFP研究稻瘟病菌与水稻的互作
《植物保护 》 2017 北大核心 CSCD
摘要：稻瘟病菌Magnaporthe oryzae严重威胁水稻的产量与质量,明确稻瘟病菌与水稻互作过程及机理,对防治稻瘟病具有重要意义。本研究利用稻瘟病菌常用致病菌株GUY11和ZB25,构建了绿色荧光蛋白GFP的过量表达菌株,并通过荧光显微观察菌株侵染寄主水稻过程中侵染结构的形成与发育,包括孢子萌发、附着胞形成、侵染钉形成、侵染菌丝增殖、坏死斑形成及产孢。另外,通过比较过量表达菌株对稻瘟病高抗水稻和易感水稻的侵染过程,发现侵染过程的差异主要集中于侵染钉的穿透和侵染菌丝的定殖。本研究为分析稻瘟病菌对寄主水稻的定殖规律提供了一种有效工具。
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