水稻泛素连接酶基因OsHUB2实时荧光定量PCR方法的建立

朱永生; 连玲; 周平; 蔡秋华; 王颖姮; 谢鸿光; 张建福; 谢华安; 《福建农业学报 》 2014

摘要：在已获得水稻泛素连接酶基因OsHUB2过表达转基因植株的基础上,根据OsHUB2基因序列设计3对引物,分别为OsHUB2-1、OsHUB2-2、OsHUB2-3,通过RT-PCR筛选条带特异单一的引物,real time PCR(qRT-PCR)方法验证最适合检测OsHUB2的反应条件。结果表明OsHUB2-F3R3扩增的PCR产物特异性最强,扩增曲线及熔解曲线等指标都在理想范围内,同时该引物能很好地区分对照及转基因材料,进而筛选出OsHUB2基因上调表达的转基因植株。Realtime体系的建立与优化为今后进一步研究水稻泛素连接酶基因OsHUB2的功能奠定了基础。

关键词： 水稻 泛素连接酶基因 荧光定量PCR