基于特异性聚合酶链式反应的西红花快速分子鉴别研究

蒋超; 袁媛; 曹亮; 金艳; 《中国药学杂志 》 2015 北大核心 CSCD

摘要：目的建立一种基于特异性聚合酶链式反应(PCR)及荧光染料检测快速鉴别西红花真伪品的方法。方法通过对叶绿体基因片段测序和比对分析,找出西红花与其常见掺伪品序列差异,针对差异碱基设计特异性引物,构建并优化聚合酶链式反应扩增反应体系,使用荧光染料法检测聚合酶链式反应产物,实现西红花的快速鉴别。结果建立了基于psb A-trn H序列的西红花鉴别体系,优化后的聚合酶链式反应反应条件为90℃预变性1 min,90℃变性5 s,58℃延伸5 s,26个循环。在聚合酶链式反应反应产物中加入染料SYBR Green I,西红花正品出现强烈绿色荧光,而伪品无荧光。结论位点特异性聚合酶链式反应方法可以简单快速鉴别西红花及其掺伪品。

关键词： 西红花 间隔区片段 叶绿体编码基因 聚合酶链式反应 特异性引物 SYBR Green I